雪茄煙及其煙葉原料,在存放不當時,均有可能出現(xiàn)霉菌生長的情況。為明確導致某產(chǎn)區(qū)雪茄煙葉霉變的元兇,我們嘗試開展了以下工作。
首先,選取發(fā)生霉菌的煙葉樣品一批,置于超凈工作臺中,用接種環(huán)挑取煙葉表面霉菌于PDA固體培養(yǎng)基中,在28℃恒溫培養(yǎng)觀察。待長出菌落后,并用接種環(huán)挑取霉菌接種到PDA中做有規(guī)則的劃線,經(jīng)過多次劃線得到純種9株單菌株,其中4株為煙梗表面篩選,5株為葉肉表面篩選。
注:上圖為煙梗提取菌株,從左到右,從上到下,依次編號為1~4
注:上圖為葉肉提取菌株,從左到右,從上到下,依次編號為5~9
將分離菌株于28℃恒溫培養(yǎng)7 d后,收集菌絲體經(jīng)液氮研磨,高速離心等操作后,進行真菌ITS區(qū)PCR擴增回收及序列測定。測序得到分離菌株ITS部分序列,將所得序列通過Blast程序與GenBank中核酸數(shù)據(jù)進行同源性比對分析。最終,分子生物學鑒定結(jié)果如下。
2025中國雪茄(四川)博覽會暨第七屆“中國雪茄之都”全球推介之旅